原发性硬化性胆管炎（PSC）是一种以胆道炎症和纤维化损伤为特征的进行性胆汁淤积性肝病，但由于其潜在分子机制尚未完全阐明，有效疗法仍然有限。2025年12月22日，北京工业大学阎新龙、解放军总医院第五医学中心刘兵、军事医学研究院生物工程研究所王友亮、军事医学研究院辐射医学研究所刘曙晨、中国农业大学陈娟团队联合在Advanced Science (IF 14.1)上发表文章“Hepatocyte Mettl3 Deficiency Drives Primary Sclerosing Cholangitis and Liver Fibrosis via Cholangiocyte-Macrophage Crosstalk”，发现Mettl3缺陷是PSC发病机制的关键驱动因素，表明靶向m6A转录组修饰是胆汁淤积性肝病一种有前景的治疗策略。

基因信息  Mettl3：m6A甲基转移酶

实验动物  5周龄C57BL/6J小鼠

病毒产品  AAV8-TBG-Mettl3，AAV8-control；> 2.0 ×10¹³ VG/mL

注射方式  尾静脉注射

注射剂量  1.0×10¹¹VG

AAV8-Mettl3增加了Mettl3表达和m6A水平

作者发现肝细胞特异性敲除Mettl3可诱导PSC，特征为进行性纤维化、胆管增生和免疫失调。之后作者通过肝细胞特异性Mettl3敲入和AAV8介导的肝脏Mettl3过表达两种方法研究了Mettl3在PSC中的作用。在肝细胞特异性Mettl3敲入小鼠（Mettl3^LKI）中，发现Mettl3表达增加，RNA m6A水平升高，ALT、AST、ALP、TBA和TBIL血清水平降低，表明PSC损伤得到改善。组织学评估也表明Mettl3^LKI小鼠对DDC诱导的PSC具有抵抗力。在AAV8介导的肝脏Mettl3过表达小鼠中，同样发现m6A水平和Mettl3表达增加，羟脯氨酸和血清ALT、AST、ALP和TBA水平降低；IHC分析显示AAV8-Mettl3治疗后DDC诱导的PSC小鼠中胶原蛋白沉积、胆管反应和巨噬细胞浸润减少；在CCl4诱导的肝纤维化模型中观察到类似的治疗效果，AAV8介导的Mettl3过表达抑制肝纤维化和炎症。这些发现表明肝细胞特异性Mettl3敲入和AAV8介导的Mettl3过表达均显著改善了DDC诱导的PSC的进展。

单细胞RNA测序表明Trem2⁺巨噬细胞是Mettl3^△Hep（肝细胞Mettl3缺失）驱动的胆管病微环境重编程的关键介质。通路富集分析揭示了白细胞增殖和迁移、细胞-细胞粘附、细胞-基质连接和粘附过程、脂质转运和脂肪酸代谢激活，批量RNA-seq显示促炎因子显著上调，包括细胞因子（Mif、Csf1、Saa1和Saa2）和趋化因子（Ccl3和Cxcl16）及其相应的受体（Cd44、Cd74和Csf1r）对应物。体外细胞实验证实METTL3通过调节m6A水平来调节MIF、CSF1、SAA1和SAA2的表达，METTL3敲低减少了m6A并上调了这些细胞因子，而其过表达则产生相反的效果。ELISA分析发现HepG2细胞中METTL3敲低增加了MIF分泌，而METTL3过表达显著抑制其表达；放线菌素D测定进揭示了METTL3敲低后MIF和CSF1 mRNA衰期延长，但METTL3过表达后mRNA加速衰减，表明METTL3通过m6A介导的RNA衰减调节MIF和CSF1的稳定性。这些结果表明METTL3通过m6A甲基化调节肝细胞源性MIF和CSF1的表达，从而促进Trem2+巨噬细胞的募集并促进胆管细胞-巨噬细胞串扰，从而促进PSC进展。

作者通过分子对接分析确定了三种Mettl3激活化合物（MA1、MA2和MA3），并评估了其对PSC的治疗效果。发现与对照和其他两种候选化合物相比，MA3治疗显著增加了总RNA m6A水平并减轻了胆管反应，改善了肝纤维化和血清损伤标志物。在CCl4诱导的肝纤维化中，MA3还可以减弱胶原蛋白沉积、血清 AST和ALT水平以及组织病理学损伤，进一步验证了其抗纤维化功效。此外MA3治疗未能改善Mettl3^ΔHep小鼠中由DDC引起的病理变化，表明MA3的治疗效果依赖于肝细胞中Mettl3的表达。这些发现表明，MA3通过针对临床前模型中的胆管增生、细胞外基质积累和炎症反应来抑制PSC和肝纤维化。

本研究发现肝细胞Mettl3缺陷通过增强Mif/Csf1的m6A依赖性分泌，导致Trem2⁺巨噬细胞浸润，进而通过Spp1-Cd44途径引发致病性胆管细胞巨噬细胞相互作用，从而促进PSC进展。恢复Mettl3功能，包括Mettl3^LKI、AAV8介导的过表达或药理激活，均能有效改善DDC诱导的PSC模型中的胆管反应、纤维化重塑和炎症反应，为胆汁淤积性肝病提供了一种有前途的治疗策略。